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本试剂盒基本原理为DNA经亚硫酸氢钠处理后，可使未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。并采用高温处理方法，极大的缩短了转变时间，提高了转变效率，转变效率可达到99%以上。同时采用硅基质膜式纯化柱通过简单的结合-洗涤-洗脱步骤，可从甲基化修饰后的溶液中回收纯化DNA，回收的DNA纯度高，完整性好，可直接用于测序、甲基化PCR检测、芯片分析、连接和转化、酶切、标记、显微注射、PCR和体外转录等各种分子生物学实验。

• 产品配用方法：
  CT Conversion Reagent、M-Dissolving Buffer均固体混合物，一定要在首次使用前制备好。将5mL无菌水加入到M-Dissolving Buffer中震荡溶解，待固体全部溶解后将M-Dissolving Buffer管中溶液全部转移至CT Conversion Reagent管中同时补加5.5mL无菌水。再将1.5mL M-Dilution Buffer加入到CT Conversion Reagent管中。在55℃溶解并震荡直至全部溶解。在使用之前将CT Conversion Reagent溶液在室温(20℃～30℃)下避光保存。每管的CT Conversion Reagent是针对50次DNA处理设计的，为了得到较好的结果，CT Conversion Reagent应当在制备后立即使用，如果不立即使用，可将CT Conversion Reagent溶液在-20℃存储1周，使用前，请务必将存储的CT Conversion Reagent溶液在室温下解冻，并且通过振动或颠倒2分钟以充分混匀，CT Conversion Reagent对光很敏感，所以要尽量减少在光下的暴露。
  
• 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在M-Wash Buffer中加入无水乙醇。

• 取20μL DNA样品，加入到离心管（自备）中，如果样品量不足，用水补至20μL。
  
• 向DNA样品中加入2.2μL的M-Dilution Buffer，混匀样品。
  
• 42℃水浴30分钟。
  
• 向上步得到的样品中，加入220μL配制好的CT Conversion Reagent溶液，混匀，80℃恒温水浴锅中避光孵育60分钟。
  
• 向上步溶液中加入480μL M-Buffer PA，温和上下颠倒混匀。
  
• 柱平衡：向已装入收集管的吸附柱DS中加入200μL Buffer PS，12000rpm（~13400×g）离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 将步骤5所得溶液全部加入到吸附柱（已装入收集管）中，室温放置2分钟，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  注意：吸附柱最大容量为750μL，若样品体积大于750μL可分批加入。
  
• 向吸附柱中加入500μL M-Buffer PA，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 向吸附柱中加入650μL M-Wash Buffer（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 12000rpm离心2分钟，倒掉废液，将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
  
• 将吸附柱放入一个新的离心管（自备）中，向吸附膜中间位置悬空滴加20μL M-Elution Buffer（pH8.5），室温放置2分钟。12000rpm离心1分钟收集DNA溶液。
  
• 向收集的20μL DNA中加入2.2μL M-Dilution Buffer，室温静止30分钟。
  
• 向溶液中加入500μL预冷的无水乙醇后颠倒混匀，并将溶液置于-20℃沉淀30分钟（过夜沉淀效果更好）。
  
• 12000rpm离心15分钟，轻轻倒掉上清。
  
• 加入75%乙醇，12000rpm离心1分钟，倒掉上清，室温下待乙醇挥发后，加入20μL M-Elution Buffer溶解，DNA置于-20℃保存。此步收集的DNA可以用于后续相关实验。